X-RIPA UltraMix预混裂解液
X-Blot | 多类型样品蛋白提取专用试剂
01 产品信息
产品编号:Xblot-012
| 产品名称 | 货号 | 规格 |
|---|---|---|
| X-RIPA UltraMix预混裂解液 | xblot-012 | 25mL*4 |
02 适用范围
适用于动物、植物、真菌及细菌的细胞或组织样品,可用于WB、IP、CoIP等实验。
03 使用流程
贴壁细胞
- 去除培养液,用 PBS 轻柔润洗 2 次,(贴壁不牢固的细胞,PBS 需缓慢沿壁滴入,避免冲掉细胞)。
- 单个 6 孔板约 1 × 10⁶ 个细胞,加入 200 μL X-RIPA UltraMix,(其他培养容器用量参照说明书底部)。
- 轻轻摇晃约 10 s,快速反复吹打后转移至洁净 EP 管,4 ℃ 冰浴静置 15 min,期间可用移液器吹打 2 次。(贴壁较牢固的细胞可配合使用细胞刮板)。
- 充分裂解后,10000-14000g离心3-5min,取上清进行后续实验。
悬浮细胞/细菌或酵母
- 离心收集细胞,用1×PBS重悬、清洗,弃去PBS。
- 每100w个细胞,加入200 μL X-RIPAUltraMix预混裂解液,吹打混匀。
- 冰浴或4°C静置15min。
- 充分裂解后,10000-14000g离心3-5min,取上清进行后续实验。
- 实验中,细菌样本需添加溶菌酶,酵母样本需添加蜗牛酶。
组织样品
- 用预冷生理盐水将切碎的组织漂洗 2–3 次,用洁净吸水纸吸干多余液体。
- 按每 20 mg 组织加入 200 μL X-RIPA UltraMix 预裂解液,采用钢珠研磨 3–5 min,随后冰上静置 10 min。
- 充分裂解后,10000-14000g离心3-5min,取上清进行后续实验。
04 注意事项
- 本裂解液可反复冻融,不影响实验效果;提取样品不适用于 Bradford 法,推荐采用 BCA 法检测蛋白浓度,进行 BCA 定量时,需使用本裂解液稀释 BSA 以制备标准曲线的拟定。
- 若样本仍含粘稠物,加倍添加裂解液,离心后取上清使用。
- 实验中,细菌样本需添加溶菌酶,酵母样本需添加蜗牛酶。
05 存储条件
4℃保存可保持活性2个月,-20℃保存可保持活性2年。
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