01 产品信息

产品编号:Xblot-012

产品名称 货号 规格
X-RIPA UltraMix预混裂解液 xblot-012 25mL*4

02 适用范围

适用于动物、植物、真菌及细菌的细胞或组织样品,可用于WB、IP、CoIP等实验。

03 使用流程

贴壁细胞

  1. 去除培养液,用 PBS 轻柔润洗 2 次,(贴壁不牢固的细胞,PBS 需缓慢沿壁滴入,避免冲掉细胞)。
  2. 单个 6 孔板约 1 × 10⁶ 个细胞,加入 200 μL X-RIPA UltraMix,(其他培养容器用量参照说明书底部)。
  3. 轻轻摇晃约 10 s,快速反复吹打后转移至洁净 EP 管,4 ℃ 冰浴静置 15 min,期间可用移液器吹打 2 次。(贴壁较牢固的细胞可配合使用细胞刮板)。
  4. 充分裂解后,10000-14000g离心3-5min,取上清进行后续实验。

悬浮细胞/细菌或酵母

  1. 离心收集细胞,用1×PBS重悬、清洗,弃去PBS。
  2. 每100w个细胞,加入200 μL X-RIPAUltraMix预混裂解液,吹打混匀。
  3. 冰浴或4°C静置15min。
  4. 充分裂解后,10000-14000g离心3-5min,取上清进行后续实验。
  5. 实验中,细菌样本需添加溶菌酶,酵母样本需添加蜗牛酶。

组织样品

  1. 用预冷生理盐水将切碎的组织漂洗 2–3 次,用洁净吸水纸吸干多余液体。
  2. 按每 20 mg 组织加入 200 μL X-RIPA UltraMix 预裂解液,采用钢珠研磨 3–5 min,随后冰上静置 10 min。
  3. 充分裂解后,10000-14000g离心3-5min,取上清进行后续实验。

04 注意事项

  1. 本裂解液可反复冻融,不影响实验效果;提取样品不适用于 Bradford 法,推荐采用 BCA 法检测蛋白浓度,进行 BCA 定量时,需使用本裂解液稀释 BSA 以制备标准曲线的拟定。
  2. 若样本仍含粘稠物,加倍添加裂解液,离心后取上清使用。
  3. 实验中,细菌样本需添加溶菌酶,酵母样本需添加蜗牛酶。

05 存储条件

4℃保存可保持活性2个月,-20℃保存可保持活性2年。

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