艾克生命 X-BCA 快速蛋白定量试剂盒
X-BCA Fast Protein Assay Kit 货号:X-BCA500
01 试剂盒组成
| 产品 | 规格(500T) |
|---|---|
| BCA试剂A(浅绿色) | 50 mL |
| BCA试剂B | 50 mL |
| 即用标准品X | 2.5 mL |
02 所需材料(自备)
96孔透明酶标板;酶标仪(562 nm);移液器及枪头;恒温水浴锅(60°C)。
03 实验前规划
在96孔板上,预先规划「标准品区」和「待测样本区」,标准品建议采用3重复,样品2重复。
注:使用艾克BCA小程序,一键实现实验规划。(可扫码进入小程序)
04 工作液配置
根据上一步骤的实验规划:工作液总体积=(标准品孔数+待测样本孔数+1)×200 μL。
试剂A与试剂B按照1:1混合,即得BCA工作液(注意区别其他品牌一般为50:1)。
05 加入BCA工作液
向「标准品区」和「待测样本区」孔中,依次加入200 μL BCA工作液。
06 加入标准品和待测样品
向「标准品区」加入即用标准品X溶液0 μL、5 μL、10 μL、15 μL、20 μL,吹打混匀2-3次。
向「待测样品区」加入待测样品2.5 μL,依次吹打混匀2-3次。
注:若样品珍贵,使用X-RIPAUltraMix稀释以后进行测量。稀释比例请牢记,最终计算得到的浓度是样本稀释后的浓度。
07 孵育
将加样完成的酶标孔板封盖后,置于水浴条件下孵育(不建议烘箱):60°C孵育15分钟,或37°C孵育30分钟,以充分进行显色反应。
08 吸光值检测
孵育结束后(无需冷却),吸水纸吸去孔板板底水滴,使用酶标仪读取562nm处吸光值(OD562)。
09 结果计算
以标准品的OD562(无需扣空白)值为纵坐标、对应的标准品蛋白浓度(0、2.5、5、7.5、10 mg/mL)为横坐标绘制标准曲线,计算待测样品的实际蛋白浓度。
艾克生命团队推出「一键BCA微信小程序」,一键实现待测样品蛋白定量和WB上样、配平方案计算,无需使用Excel公式计算。
10 检测结果图片/文件上传要求
一、检测结果页面拍照要求(参考图1)
- 完整拍摄检测结果表格,确保表头(A-H行、1-12列)完整显示。
- 手机镜头尽量与屏幕保持平行,正面拍摄,避免倾斜和透视变形。
- 保证画面清晰,数据内容可正常辨认。
- 避免屏幕反光、阴影遮挡或过度曝光。
二、原始文件上传要求(参考图2)
如拍照结果识别不理想,建议直接上传酶标仪导出的原始数据文件。
- 原始文件必须保留完整表格信息。
- 表头(A-H行、1-12列)必须完整保留,不得删除、裁剪或修改。
- 文件格式请保持仪器导出的原始格式。
注意事项
- 标准品X溶液无需稀释,为即用型。
- 待测样品建议按照2.5 μL原液测试,想要更高准确度,可以按1.5 μL/2.5 μL/3.5 μL三平行测试。
- 若待测样品非常珍贵,可以用X-RIPAUltraMix稀释以后进行测定。
- 工作液为1:1混合,不同于市面上其他品牌的50:1。
- 本试剂盒线性范围:0.5 mg/mL ~ 15 mg/mL
- 如果测得样品浓度>15 mg/mL,建议重新加入待测样品1 μL,重新测试,获得更加精准浓度。
- 如果测得样品浓度<0.5 mg/mL,建议重新加入待测样品20 μL,重新测试,获得更加精准浓度。
储存方式
常温储存
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